中國(guó)豬業(yè)科技大會(huì)暨中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì) 學(xué)術(shù)年會(huì)在廈門舉行。作為從事豬病研究的科研工作者，筆者參加了本次會(huì)議，現(xiàn)將所學(xué)內(nèi)容分享如下。
本次會(huì)議中陳煥春院士、楊漢春教授和姜平教授在報(bào)告中均將豬偽狂犬病毒的變異作為報(bào)告內(nèi)容的一個(gè)***，可謂是“觀當(dāng)今豬病，英雄所見(jiàn)略同”。主要觀點(diǎn)如下。1.1 我國(guó)豬偽狂犬病的問(wèn)題與現(xiàn)狀豬群老病新發(fā)不斷出現(xiàn)，危害日趨嚴(yán)重。偽狂犬病就是***突出的一例，偽狂犬病毒中g(shù)C、gE 等多抗原位點(diǎn)發(fā)生變異，屬于強(qiáng)毒株。偽狂犬病的主要臨床表現(xiàn)有：妊娠母豬發(fā)生流產(chǎn)、死胎，以產(chǎn)死胎為主；新生仔豬大量死亡，3-15 日齡的仔豬死亡率可達(dá)100% ；斷奶仔豬發(fā)病率10-30%，呈頑固性腹瀉和零星的神經(jīng)癥狀；育肥豬90-150 日齡gE 野毒陽(yáng)性率轉(zhuǎn)高，呈高燒、伴呼吸系統(tǒng)癥狀；青年母豬和空懷母豬不發(fā)情、返情、屢配不孕；公豬***炎，喪失種用能力。1.1.1 豬偽狂犬病毒的免疫學(xué)特點(diǎn)1）豬感染后6-10 d 可產(chǎn)生IgM，隨即產(chǎn)生IgA、IgG1、IgG2，其中特異性IgM 和IgA 可持續(xù)3 個(gè)月，說(shuō)明在偽狂犬的免疫中具有黏膜免疫應(yīng)答。2）活疫苗或滅活疫苗免疫豬，都可誘發(fā)產(chǎn)生抗體，其中IgG1 和IgG2 能中和病毒，在免疫保護(hù)中發(fā)揮作用，但是抗體滴度與臨床保護(hù)力之間的相關(guān)性是不完全的，不能完全保護(hù)動(dòng)物。3）偽狂犬病毒自生誘導(dǎo)的體液抗體水平較低，細(xì)胞免疫在偽狂犬病毒的免疫上占主導(dǎo)地位。1.1.2 當(dāng)前我國(guó)豬偽狂犬病的流行現(xiàn)狀1）2014—2015 年全國(guó)有20 多個(gè)省市檢測(cè)到偽狂犬野毒的感染流行。2）部分豬場(chǎng)豬群的陽(yáng)性率達(dá)70%以上，妊娠母豬，35% 出現(xiàn)流產(chǎn)。3）24.5% 免疫Bartha-K61 疫苗的豬場(chǎng)發(fā)生豬偽狂犬病，所造成的損失持續(xù)上升（Yu XL.et al，2014）。1.1.3 豬偽狂犬臨床分離株毒力實(shí)驗(yàn)1）相比經(jīng)典偽狂犬毒株，新分離毒株的抗原性發(fā)生變異，對(duì)豬的致病力顯著增強(qiáng)。2）對(duì)新分離毒株進(jìn)行基因序列進(jìn)化分析，全基因組位于一個(gè)相對(duì)獨(dú)立的基因分支，與Bartha-K61 株不在同一個(gè)分支。3）SMX2012 分離株導(dǎo)致50 日齡仔豬的神經(jīng)癥狀和死亡。4）SMX2012 分離株導(dǎo)致嚴(yán)重的呼吸道癥狀。5）SMX2012 分離株導(dǎo)致長(zhǎng)時(shí)間的發(fā)熱和精神沉郁。2）具備凈化的條件：選用基因缺失疫苗（如四川華神獸用生物制品有限公司生產(chǎn)的豬偽狂犬病活疫苗AS215株三基因缺失苗-撲偽優(yōu)）；野毒感染鑒別診斷方法簡(jiǎn)單易行；歐美國(guó)家已經(jīng)有了成功經(jīng)驗(yàn)。3）凈化注意事項(xiàng)：制定區(qū)域凈化規(guī)劃；有效的種豬野毒抗體調(diào)查，確定凈化可行性；嚴(yán)格檢測(cè)與淘汰；制定嚴(yán)格生物安全措施。下圖為一豬場(chǎng)采取的檢測(cè)計(jì)劃：
4）免疫程序：生產(chǎn)母豬：每年2-4次；后備母豬：配種前免疫1-2 次；公豬：每年免疫2 次；商品豬：偽狂犬野毒陽(yáng)性豬場(chǎng)：1-3 日齡滴鼻+10 周齡肌注；偽狂犬野毒陰性豬場(chǎng)：8 周齡肌注+12-14 周齡肌注。筆者：聽(tīng)完幾位大會(huì)專家關(guān)于豬偽狂犬病的報(bào)告，結(jié)合自己在豬偽狂犬病研究中多年的體會(huì)，發(fā)現(xiàn)對(duì)于偽狂犬野毒陽(yáng)性豬場(chǎng)，如果免疫程序得當(dāng)，豬場(chǎng)生物安全工作到位，生產(chǎn)出偽狂犬陰性商品豬或后備豬是完全切實(shí)可行的。即不斷地用偽狂犬陰性后備豬去更換偽狂犬野毒抗體陽(yáng)性經(jīng)產(chǎn)母豬，逐漸降低種豬群偽狂犬野毒豬的比例，直至凈化。過(guò)去幾十年，世界上一些主要偽狂犬病流行國(guó)家相繼啟動(dòng)了根除計(jì)劃并已取得了成功，首先是英國(guó)和丹麥于20 世紀(jì)80 年代末公布取得成功，接著荷蘭、比利時(shí)實(shí)現(xiàn)偽狂犬病的凈化，美國(guó)也于1989 年開始啟動(dòng)為期10 年的全國(guó)性凈化計(jì)劃，現(xiàn)在美國(guó)已經(jīng)無(wú)偽狂犬野毒感染。所以，通過(guò)“免疫→檢測(cè)→淘汰→補(bǔ)充陰性后備豬→免疫→檢測(cè)→淘汰”的偽狂犬凈化措施是切實(shí)可行的。
感染性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，豬更容易經(jīng)皮膚傷口感染，經(jīng)口和胃腸道感染所需的病毒量明顯更高。同樣，由于感染豬唾液中的PRRSV 可持續(xù)存在數(shù)周，因此，豬只之間互相攻擊時(shí)發(fā)生的撕咬、傷口、刮擦等均易導(dǎo)致感染的發(fā)生；豬群一旦感染上該病，很難根除，大多數(shù)豬群可以長(zhǎng)期帶毒，一旦其他病原入侵或豬群免疫力下降，就會(huì)暴發(fā)該病。預(yù)防PRRSV 的目的是阻止PRRSV 進(jìn)入未感染的豬群或者阻止新的PRRSV 毒株進(jìn)入已感染過(guò)其他毒株的豬群。人們一直認(rèn)為患病動(dòng)物和***是PRRSV 的主要來(lái)源，但是現(xiàn)在已發(fā)現(xiàn)了其他的重要感染途徑。發(fā)現(xiàn)很多新感染不是由本豬場(chǎng)的病豬或者***傳播的，而是有臨近的感染豬群，未執(zhí)行生物安全程序而傳播的。由于PRRSV 在潮濕、寒冷的環(huán)境容易存活，因此農(nóng)場(chǎng)中使用的所有運(yùn)輸設(shè)備和材料都要清洗晾干，并嚴(yán)格按批次進(jìn)行生產(chǎn)；單向豬群流動(dòng)；車輛的清洗與干燥。由于目前對(duì)PRRS 的免疫特性不完全了解，保護(hù)的機(jī)理及抗體在病毒清理和免疫記憶所扮演的角色進(jìn)展緩慢，主要的保護(hù)性應(yīng)答目前仍有待研究，因此難以用現(xiàn)有活疫苗或滅活疫苗來(lái)穩(wěn)定可靠地控制PRRS，疫苗免疫并非能使所有的豬得到保護(hù)，豬只并非產(chǎn)生同樣的應(yīng)答，不同的豬場(chǎng)可根據(jù)豬群具體情況采用相應(yīng)的免疫策略，可在本病暴露前4 周進(jìn)行疫苗免疫。對(duì)于豬場(chǎng)一般應(yīng)以豬群穩(wěn)定為主，不建議頻繁更換現(xiàn)有疫苗毒株。筆者：控制PRRS 的目標(biāo)是***病毒在生產(chǎn)各環(huán)節(jié)的傳播。預(yù)防或發(fā)病治療時(shí)，首先應(yīng)選擇抗生素防止繼發(fā)感染，可配合抗病毒、清熱解毒類中藥同時(shí)使用。即便如此，恒定不變的PRRS控制措施也是不可行的。斷奶豬群中慢性PRRS 的控制是獸醫(yī)所面臨的***為棘手的問(wèn)題之一。病毒在保育或育肥豬之間的循環(huán)傳播是通過(guò)病毒從日齡較大的感染豬只傳播到新近斷奶的豬只來(lái)實(shí)現(xiàn)的。為阻止PRRSV 在慢性感染豬群中的繼續(xù)傳播，可以采用淘汰部分病豬的方法進(jìn)行控制。研究試驗(yàn)表明淘汰部分病豬的方法具有明顯改進(jìn)日增重、減少死亡并從總體上減少護(hù)理病豬經(jīng)濟(jì)損失的優(yōu)點(diǎn)。這種方法的缺點(diǎn)是需要淘汰日齡較大的豬只，而且可能需要定期重復(fù)淘汰以維持生產(chǎn)性狀的改進(jìn)。如果哺乳仔豬發(fā)生急性感染，需要***出生1 d內(nèi)不同窩仔豬之間的流動(dòng)、在斷奶前淘汰已感染的仔豬以及保持嚴(yán)格的全進(jìn)全出模式等。豬瘟亞臨床感染→胎盤感染→種豬繁殖障礙→仔豬先天帶毒→后備豬潛伏帶毒形成亞臨床感染，這是目前規(guī)模化豬場(chǎng)豬瘟持續(xù)存在的一個(gè)重要原因。因此，生豬養(yǎng)殖企業(yè)要根據(jù)現(xiàn)有條件盡力、盡早實(shí)施豬瘟的凈化，這也是控制和消滅豬瘟的必經(jīng)之路。美國(guó)僅用16 年時(shí)間通過(guò)疫病控制階段、降低發(fā)病率及消滅豬瘟和防止再次感染4 個(gè)階段徹底根除了存在一個(gè)多世紀(jì)的豬瘟。美國(guó)豬瘟的根除為全世界動(dòng)物疫病的消滅樹立了典范。1）提高經(jīng)濟(jì)效益：16 年間支出約為1.4 億美元，實(shí)際損失可能超過(guò)15億美元。成功實(shí)施豬瘟根除計(jì)劃的效益/ 成本比為13.2 ∶1，這意味著在成功的根除計(jì)劃中每投入1美元將會(huì)減少13.2 美元的豬瘟患病損失。2）促進(jìn)國(guó)際貿(mào)易：1962 年有12 個(gè)國(guó)家因?yàn)樨i瘟禁止從美國(guó)進(jìn)口豬肉，這個(gè)潛在的市場(chǎng)估計(jì)每年有2 000 萬(wàn)美元。豬瘟的根除使得美國(guó)擁有這些潛在市場(chǎng)的競(jìng)爭(zhēng)機(jī)會(huì)，其豬產(chǎn)品可重返國(guó)際市場(chǎng)，所獲利潤(rùn)遠(yuǎn)大于根除豬瘟的開支。3）獲得了消滅動(dòng)物疫病的經(jīng)驗(yàn)：在與豬瘟的斗爭(zhēng)中，許多聯(lián)邦和各州獸醫(yī)人員及其他相關(guān)人員獲得了實(shí)施根除疫病計(jì)劃中各種嚴(yán)格措施的直接經(jīng)驗(yàn)。美國(guó)豬瘟的消滅為全世界動(dòng)物疫病的消滅樹立了典范。4）發(fā)揮公眾和非官方獸醫(yī)組織的積極作用：美國(guó)豬瘟根除不是僅依靠政府機(jī)構(gòu)來(lái)提出或維持實(shí)施根除計(jì)劃的要求，代表大眾利益的顧問(wèn)團(tuán)體也在計(jì)劃實(shí)施中發(fā)揮了積極作用。1）根據(jù)美國(guó)的經(jīng)驗(yàn)，一種疫病的根除策略應(yīng)包括4 個(gè)步驟，作為一般規(guī)則。中國(guó)飼養(yǎng)量巨大，同時(shí)存在著不同的養(yǎng)豬模式。在這種情況下，***免疫是我國(guó)控制豬瘟的基本策略，從而實(shí)現(xiàn)動(dòng)物疫病從有效控制到逐步根除的目標(biāo)。2）通過(guò)國(guó)家十一五科技計(jì)劃支撐計(jì)劃《豬瘟豬偽狂犬病綜合防控技術(shù)集成與示范》項(xiàng)目的支持，在示范豬場(chǎng)建立豬瘟凈化模式。種豬場(chǎng)豬瘟凈化一般分為三個(gè)階段。***階段對(duì)豬場(chǎng)帶毒情況進(jìn)行調(diào)查和評(píng)估，通過(guò)免疫和淘汰等手段提高抗體合格率；第二階段穩(wěn)定控制豬瘟情況，保證母豬群抗體合格率在90%以上，公豬逐頭監(jiān)測(cè)，進(jìn)一步監(jiān)測(cè)和維持抗體水平；第三階段在穩(wěn)定控制基礎(chǔ)上進(jìn)一步全群凈化豬瘟病毒，全場(chǎng)公豬、母豬逐頭檢測(cè)扁桃體抗體水平，病毒檢測(cè)無(wú)陽(yáng)性豬。1）臨床癥狀和抗體水平綜合評(píng)估豬場(chǎng)帶毒情況調(diào)查和評(píng)估豬場(chǎng)種群帶毒情況是豬瘟凈化的基礎(chǔ)。張桂紅建議，首先要進(jìn)行豬群豬瘟抗體的檢測(cè)，了解豬群豬瘟抗體水平。母豬群按10%的比例進(jìn)行采樣，種公豬進(jìn)行全群采樣。了解豬群的豬瘟抗體合格率，抗體整齊度、離散度情況。但由于ELISA試劑盒檢測(cè)結(jié)果和實(shí)際中和抗體水平之間還有一定的差異，所以還要考慮臨床觀察的結(jié)果。張桂紅提醒，首先分析相關(guān)各項(xiàng)生產(chǎn)數(shù)據(jù)，包括流產(chǎn)、弱仔、死胎、畸形胎數(shù)及哺乳期神經(jīng)震顫、運(yùn)動(dòng)障礙、抽搐等癥狀的仔豬數(shù)等。并觀察是否有保育及育肥期便秘、腹瀉交替出現(xiàn)，腹下、耳和四肢內(nèi)側(cè)等少毛部位出血、發(fā)紺等現(xiàn)象。剖檢是否可見(jiàn)多發(fā)性出血性特征的敗血癥變化等癥狀，初步評(píng)估豬群豬瘟野毒帶毒狀況。據(jù)中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所豬病研究室主任仇華吉介紹，豬瘟抗體檢測(cè)（阻斷ELISA）阻斷率大于40%判定為陽(yáng)性，小于30%判定為陰性。如果是血清豬瘟抗原試劑盒（ELISA）檢測(cè)，陽(yáng)性豬淘汰。同時(shí)采集扁桃體進(jìn)行熒光抗體和RT-PCR方法檢測(cè)豬瘟抗原，豬瘟野毒陽(yáng)性豬直接淘汰。仇華吉老師建議對(duì)豬瘟抗體檢測(cè)陽(yáng)性和豬瘟抗原陰性種豬，免疫注射豬瘟活疫苗2頭份；對(duì)豬瘟抗體陰性種豬隔離，采集扁桃體和血清，扁桃體進(jìn)行免疫熒光和RT-PCR檢測(cè)豬瘟抗原檢測(cè)；血清進(jìn)行豬瘟抗原ELISA檢測(cè)，抗原陽(yáng)性種豬淘汰，抗原陰性和抗體陰性豬免疫注射豬瘟活疫苗2頭份，免疫后30天采集種豬血清檢測(cè)豬瘟抗體，陽(yáng)性豬留場(chǎng)，陰性豬淘汰。張桂紅建議，對(duì)抗體不合格豬補(bǔ)免6周后再檢測(cè)抗體，如果整體抗體合格率在90%以上，即可進(jìn)入第二階段穩(wěn)定控制期。如合格率不到90%，則對(duì)不合格豬群再補(bǔ)充免疫一次，還不合格的直接淘汰。2）堅(jiān)決淘汰抗原陽(yáng)性和補(bǔ)免抗體不合格種豬進(jìn)入豬瘟穩(wěn)定控制期之后，應(yīng)在持續(xù)不斷的抗體監(jiān)測(cè)和淘汰基礎(chǔ)上，加強(qiáng)對(duì)豬瘟抗原的檢測(cè)，區(qū)分野毒和疫苗毒。張桂紅表示，對(duì)具有繁殖障礙現(xiàn)象的母豬，采集血液，用豬瘟病毒（CSFV-Ag）抗原ELISA檢測(cè)試劑盒檢測(cè)。并按母豬群10%、種公豬群100%的比例采集扁桃體樣本，經(jīng)RT-PCR擴(kuò)增鑒別疫苗毒和野毒，必要時(shí)測(cè)序。后備豬混群前進(jìn)行豬瘟抗體檢測(cè)，補(bǔ)免后仍不合格的不能留做種用，轉(zhuǎn)育肥豬處理。所有進(jìn)入種豬群的后備豬必須要求豬瘟抗體和豬偽狂犬病抗體都合格。并做好種母豬、種公豬、豬精的帶毒狀況的監(jiān)測(cè)，判斷是否含有病原。隨著凈化措施的實(shí)施，豬群逐步進(jìn)入全群凈化階段。該階段要求全種群及準(zhǔn)備引入的后備豬扁桃體樣本檢測(cè)豬瘟病毒100%陰性，且抗體水平合格。張桂紅介紹，可在豬群中設(shè)立一定數(shù)量的哨兵豬來(lái)監(jiān)測(cè)和評(píng)估凈化效果。初步凈化1年后，可在育肥豬群中設(shè)立豬瘟抗體陰性的非免疫哨兵豬，育肥哨兵豬的數(shù)量為每個(gè)生產(chǎn)線30頭，分散在不同的豬欄。1個(gè)月后進(jìn)行豬瘟抗體檢測(cè)，抗體應(yīng)為陰性。再隔1年后，設(shè)立非免疫豬瘟抗體陰性母豬哨兵豬，母豬哨兵豬占母豬總數(shù)的2%-3%，或***少為10頭，也可固定一定數(shù)量的母豬哨兵豬循環(huán)使用。非免疫母豬哨兵豬分別在配種前、懷孕后40-50天、80-90天、產(chǎn)后2周采血檢測(cè)，其后代（交叉寄養(yǎng)的除外）于3-4周齡檢測(cè)，豬瘟抗體均應(yīng)為陰性。哈獸研維科公司豬病技術(shù)服務(wù)專家夏偉認(rèn)為，豬瘟凈化的標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)為無(wú)豬瘟臨床病例，免疫抗體陽(yáng)性率90%以上（CSF抗體阻斷值高于40的種豬占總?cè)后w的90%以上），連續(xù)2年豬瘟抗原（ELISA法）5%抽樣檢測(cè)和95%自檢沒(méi)有病原檢出后，視為達(dá)到凈化標(biāo)準(zhǔn)。他表示，通過(guò)“普防免疫-抗原，抗體檢測(cè)-淘汰”的措施凈化豬瘟，比單純采取采集扁桃體檢測(cè)豬瘟抗原從而淘汰陽(yáng)性豬只更準(zhǔn)確。要做好豬瘟凈化工作，必須堅(jiān)決徹底地淘汰豬瘟抗原陽(yáng)性豬只和經(jīng)強(qiáng)化免疫后豬瘟抗體仍不合格的豬只，這一點(diǎn)至關(guān)重要，否則凈化工作將成為無(wú)稽之談。
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